کیت تشخیص الایزا آنتی بادی ویروسی بیماری بورس عفونی
شماره مدل: VD501E
مخفف:IBDV Ab Elisa
نمونه: سرم
شرح
مشخصات
IBDV Ab Elisa
استفاده در نظر گرفته شده:
کیت تشخیص ELISA آنتی بادی ویروس بیماری بورس عفونی برای تعیین آنتی بادی های ویروس بیماری بورس عفونی در سرم مرغ در شرایط آزمایشگاهی استفاده می شود.
نمونه:سرم
مواد ارائه شده:
روش های آزمون و تفسیر
مرحله 1 روش آزمایش
1.1 آماده سازی محلول شستشو
مایع شستشو با غلظت کار: قبل از استفاده، محلول شستشو باید به دمای اتاق (20-25 درجه) برگردانده شود و به طور یکنواخت تکان داده شود تا یکنواخت شود. سپس 20 برابر محلول شستشو غلیظ را با آب تصفیه شده رقیق کنید (مثلاً 5 میلی لیتر محلول غلیظ شستشو را به 95 میلی لیتر آب تصفیه شده اضافه می کنند) خوب مخلوط کنید و مایع شستشوی رقیق شده را می توان در دمای 8-2 درجه به مدت 7 روز نگهداری کرد.
1.2 آماده سازی نمونه
① خون کامل حیوان گرفته شد، با سرعت 4000 دور در دقیقه به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ شد و مایع رویی جمع آوری شد. سرم همچنین می تواند به طور طبیعی بدون همولیز منعقد شود.
②سرم مورد آزمایش را 25 بار رقیق کنیددر صفحه رقت سرم (به عنوان مثال:6 لیتر از سرم مورد آزمایش را به 144 لیتر اضافه کنیدرقیق کننده نمونه).
توجه: کنترل های منفی و مثبت نیازی به رقیق شدن ندارند.
1.3 روش تست
① برچسب آنزیمی Microplate را بردارید (با توجه به تعداد نمونه ها، می توان چندین بار از هم جدا شده و استفاده کرد)، 100 لیتر از سرم رقیق شده را به برچسب آنزیمی Microplate اضافه کنید، هر کدام را دو چاه برای کنترل منفی و کنترل مثبت قرار دهید و به ترتیب 100 ul به چاه واکنش اضافه کنید. نمونه را به آرامی در چاه تکان دهید، با استفاده از فیلم صفحه آب بندی برای پوشش صفحه، و در دمای 37 درجه به مدت 30 دقیقه انکوبه کنید.
②فیلم صفحه آب بند را باز کنید، محلول داخل صفحه را به خوبی تکان دهید، 300 میکرولیتر مایع شستشو با غلظت کارکرد را به هر چاه اضافه کنید و سپس مایع را در چاه دور بریزید. مراحل بالا را 5 بار تکرار کنید و در نهایت روی یک کاغذ جاذب تمیز خشک کنید.
③100µl Conjugate آنزیم را به هر چاهک اضافه کنید، روی صفحه را بپوشانید و در دمای 37 درجه به مدت 30 دقیقه انکوبه کنید.
④فیلم صفحه آب بند را باز کنید، محلول را در بشقاب به خوبی تکان دهید، 300 میکرولیتر مایع شستشو با غلظت کار را به هر چاه اضافه کنید و سپس مایع را در چاه دور بریزید. مراحل بالا را 5 بار تکرار کنید و در نهایت روی یک کاغذ جاذب تمیز خشک کنید.
⑤100 میکرولیتر محلول بستر را به هر چاهک اضافه کنید، روی صفحه را بپوشانید و به مدت 10 دقیقه در دمای 37 درجه دور از نور انکوبه کنید.
⑥50µl محلول توقف را به هر چاهک اضافه کنید و نتیجه را در عرض 5 دقیقه تعیین کنید.
مرحله 2 تفسیر نتیجه
مقدار OD450 هر چاهک روی میکروپلیت ریدر 96 چاهی خوانده شد.
2.1 اعتبار سنجی
میانگین مقدار OD450nm کنترل منفی کمتر از 0.15 بود و میانگین مقدار OD450nm کنترل مثبت / میانگین مقدار OD450nm کنترل منفی بزرگتر یا مساوی 3.5 بود، نتایج تجربی معتبر بودند. در غیر این صورت، آزمایش باید تکرار شود.
2.2 روش محاسبه
برای هر نمونه، S/P را به صورت زیر با استفاده از نمونه اصلاح شده و مقادیر کنترل محاسبه کنید:
S / P=(ODنمونه-ODNC) / (ODکامپیوتر-ODNC)
2.3 تفسیر نتایج
وقتی S/P < 0.3 باشد، منفی ارزیابی می شود.
وقتی S/P > 0.35 باشد، مثبت ارزیابی می شود.
وقتی 0.3 کمتر یا مساوی S/P کمتر یا مساوی 0.35 باشد مشکوک ارزیابی می شود و پیشنهاد می شود یک هفته بعد نمونه برداری و آزمایش تکرار شود.
تگ های محبوب: کیت تشخیص آنتی بادی الایزا ویروس بیماری بورس عفونی، تامین کنندگان کیت تشخیص آنتی بادی الایزا ویروس بیماری بورس عفونی چین، تولید کنندگان، کارخانه
یک جفت: نه
بعدی: نه
