ویروس- O بیماری ویروس- O آنتی بادی ELISA

مشخصات

fmdv-o ab elisa

استفاده در نظر گرفته شده: ویروس بیماری گاو و دهان گاو

کیت تشخیص آنتی بادی ELISA برای تعیین آنتی بادی پا و دهان در سرم گاو در شرایط آزمایشگاهی است. از این آزمایش برای ارزیابی وضعیت ایمنی آنتی بادی ویروس ویروس Op و دهان استفاده می شود.

نمونه: سرم

مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است:

آب خالص

پیپ

96- خوب خواننده میکروپلیت (450nm)

تایمر

سانتریفیوژ (4000 دور در دقیقه)

ماشین لباسشویی

اجاق گاز (37 درجه)

روشهای آزمون و تفسیر

مرحله 1 روش آزمون

1.1 آماده سازی محلول شستشو

Wغلظت ارکینگ wمایع ashing:قبل از استفاده ، محلول شستشو باید به دمای اتاق (درجه {0}} درجه) بازگردد و به طور مساوی متزلزل شود تا آن را یکنواخت کند. سپس 20 برابر محلول شستشوی غلیظ با آب خالص (به عنوان مثال ، محلول شستشوی غلیظ 5 میلی لیتر به آب خالص 95 میلی لیتر اضافه می شود) ، خوب مخلوط کنید ، و مایع شستشوی رقیق شده را می توان به مدت 7 روز در درجه {4}} ذخیره کرد.

1.2 آماده سازی نمونه

① خون کامل حیوانات گرفته شد ، به مدت 10 دقیقه در 4000 دور در دقیقه سانتریفیوژ شد و Supernatant جمع آوری شد. سرم همچنین می تواند به طور طبیعی بدون همولیز منعقد شود.

ample نمونه سرم 1:25 (نمونه سرم 5UL را به رقیق نمونه 120UL اضافه کنید) و کاملاً مخلوط کنید.

توجه: کنترل های منفی و مثبت نیز به رقیق نیاز دارند.

1.3 آماده سازی مزدوج آنزیم

کونژوگه آنزیم 1:90 را رقیق کنید (5UL آنزیم آنزیم (x100) را به رقیق نمونه 445UL اضافه کنید) و کاملاً مخلوط کنید.

1.4 روش تست

میکروپلیت برچسب آنزیم (با توجه به تعداد نمونه ها ، می توانید چندین بار از هم جدا شده و استفاده کنید) ، 100UL از سرم رقیق شده را به میکروپلیت برچسب آنزیم اضافه کنید ، هر کدام دو چاه را برای نمونه های منفی و مثبت قرار دهید و هر کدام 100UL را برای منفی اضافه کنید و به ترتیب کنترل مثبت به واکنش. با استفاده از فیلم صفحه آب بندی برای پوشاندن صفحه ، نمونه را به آرامی در چاه تکان دهید و به مدت 30 دقیقه در 37 درجه انکوبه کنید.

the فیلم صفحه آب بندی را باز کنید ، محلول را در چاه در صفحه تکان دهید ، 300 میکرولیتر مایع شستشوی غلظت کار را به هر چاه اضافه کنید و سپس مایع را در چاه دور کنید. مراحل فوق را 5 بار تکرار کنید و در آخر روی یک کاغذ جاذب تمیز خشک کنید.

③ 100 میکرولیتر آنزیم به هر چاه کونژوگه شده ، صفحه را بپوشانید و به مدت 45 دقیقه در 37 درجه انکوبه کنید.

the فیلم صفحه آب بندی را باز کنید ، محلول را در چاه در صفحه خاموش کنید ، 300 میکرولیتر مایع شستشوی غلظت کار را به هر چاه اضافه کنید و سپس مایع را در چاه دور کنید. مراحل فوق را 5 بار تکرار کنید و در آخر روی یک کاغذ جاذب تمیز خشک کنید.

محلول بستر 100 میکرولیتر برای هر چاه ، صفحه را بپوشانید و به مدت 10 دقیقه با 37 درجه دور از نور انکوبه کنید.

محلول متوقف شده 50 میکرولیتر برای هر چاه ، و نتیجه را در مدت 5 دقیقه تعیین کنید.

مرحله 2 تفسیر نتیجه

مقدار OD450 از هر چاه در خواننده میکروپلیت {1}}} خوانده شد.

اعتبار سنجی 2.1

میانگین مقدار OD450nm از کنترل منفی بود<0.15 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 روش محاسبه

برای هر نمونه ، S/P را به شرح زیر با استفاده از مقادیر تصحیح شده و مقادیر کنترل محاسبه کنید:

2.3 تفسیر نتیجه

وقتی S/P<0.15, it is judged as negative.

هنگامی که S/P بزرگتر از یا مساوی با 0. 25 ، به عنوان مثبت قضاوت می شود.

هنگامی که 0. 15 کمتر از یا مساوی با S/P<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

تگ های محبوب: کیت ELISA آنتی بادی ویروس- O ویروس- O ویروس- O ، ویروس ویروس و ویروس و دهان و دندان و آنتی بادی کیت ، تولید کنندگان ، تولید کنندگان ، کارخانه