آنتی بادی ویروس ویروس ویروس ویروس ELISA

مشخصات

 

روشهای آزمون و تفسیر

 

مرحله 1 روش آزمون

1.1 آماده سازی محلول شستشو

Wغلظت ارکینگ wمایع ashing:قبل از استفاده ، محلول شستشو باید به دمای اتاق (درجه {0}} درجه) بازگردد و به طور مساوی متزلزل شود تا آن را یکنواخت کند. سپس 20 برابر محلول شستشوی غلیظ با آب خالص (به عنوان مثال ، محلول شستشوی غلیظ 5 میلی لیتر به آب خالص 95 میلی لیتر اضافه می شود) ، خوب مخلوط کنید ، و مایع شستشوی رقیق شده را می توان به مدت 7 روز در درجه {4}} ذخیره کرد.

1.2 آماده سازی نمونه

① خون کامل حیوانات گرفته شد ، به مدت 10 دقیقه در 4000 دور در دقیقه سانتریفیوژ شد و Supernatant جمع آوری شد. سرم همچنین می تواند به طور طبیعی بدون همولیز منعقد شود.

sample نمونه سرم 1:50 (نمونه سرم 3UL را به رقیق نمونه 147UL اضافه کنید) و کاملاً مخلوط کنید.

توجه: کنترل های منفی و مثبت نیز به رقیق نیاز دارند.

1.3 آماده سازی مزدوج آنزیم

کونژوگه آنزیم 1: 250 را رقیق کنید (اضافه کردن آنزیم 2UL آنزیم (x100) را به رقیق نمونه 498UL اضافه کنید) و کاملاً مخلوط کنید.

1.4 روش تست

میکروپلیت برچسب آنزیم (با توجه به تعداد نمونه ها ، می توانید چندین بار از هم جدا شده و استفاده کنید) ، 100UL از سرم رقیق شده را به میکروپلیت برچسب آنزیم اضافه کنید ، هر کدام دو چاه را برای نمونه های منفی و مثبت قرار دهید و هر کدام 100UL را برای منفی اضافه کنید و به ترتیب کنترل مثبت به واکنش. با استفاده از فیلم صفحه آب بندی برای پوشاندن صفحه ، نمونه را به آرامی در چاه تکان دهید و به مدت 30 دقیقه در 37 درجه انکوبه کنید.

the فیلم صفحه آب بندی را باز کنید ، محلول را در چاه در صفحه تکان دهید ، 300 میکرولیتر مایع شستشوی غلظت کار را به هر چاه اضافه کنید و سپس مایع را در چاه دور کنید. مراحل فوق را 5 بار تکرار کنید و در آخر روی یک کاغذ جاذب تمیز خشک کنید.

③ 100 میکرولیتر آنزیم به هر چاه کونژوگه شده ، صفحه را بپوشانید و به مدت 45 دقیقه در 37 درجه انکوبه کنید.

the فیلم صفحه آب بندی را باز کنید ، محلول را در چاه در صفحه خاموش کنید ، 300 میکرولیتر مایع شستشوی غلظت کار را به هر چاه اضافه کنید و سپس مایع را در چاه دور کنید. مراحل فوق را 5 بار تکرار کنید و در آخر روی یک کاغذ جاذب تمیز خشک کنید.

محلول بستر 100 میکرولیتر برای هر چاه ، صفحه را بپوشانید و به مدت 10 دقیقه با 37 درجه دور از نور انکوبه کنید.

محلول متوقف شده 50 میکرولیتر برای هر چاه ، و نتیجه را در مدت 5 دقیقه تعیین کنید.

 

مرحله 2 تفسیر نتیجه

 

مقدار OD450 از هر چاه در خواننده میکروپلیت {1}}} خوانده شد.

اعتبار سنجی 2.1

میانگین مقدار OD450nm از کنترل منفی بود<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 روش محاسبه

برای هر نمونه ، S/P را به شرح زیر با استفاده از مقادیر تصحیح شده و مقادیر کنترل محاسبه کنید:

2.3 تفسیر نتیجه

وقتی S/P<0.25, it is judged as negative.

هنگامی که S/P بزرگتر از یا مساوی با 0 35. ، به عنوان مثبت قضاوت می شود.

وقتی 0. 25 کمتر از یا مساوی با S/P<0.35, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

 

تگ های محبوب: آنتی بادی ویروس ویروس ویروس ویروس ویروس ELISA ، کیت ویروس ویروس ویروس ویروس ویروس ویروس ELISA ، تولید کنندگان ، تولید کنندگان ، کارخانه