آنتی بادی ویروس Pseudorabies Anti-Ge آنتی بادی ELISA

مشخصات

prv-ge ab elisa

استفاده در نظر گرفته شده: ویروس Psporcine Pseudorabies Ge

کیت تشخیص آنتی بادی ELISA برای تعیین آنتی بادی GE در سرم خوک ویروس شبه ای خوک در شرایط آزمایشگاهی است. این آزمایش برای تمایز وحشی آلوده استفاده می شود

ویروس و واکسینه شده از واکسیناسیون با واکسن حذف ژن GE.

نمونه: سرم

مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است:

آب خالص

پیپ

96- خوب خواننده میکروپلیت (450nm)

تایمر

سانتریفیوژ (4000 دور در دقیقه)

ماشین لباسشویی

اجاق گاز (37 درجه)

 

روشهای آزمون و تفسیر

مرحله 1 روش آزمون

1.1 آماده سازی محلول شستشو

Wغلظت ارکینگ wمایع ashing:قبل از استفاده ، محلول شستشو باید به دمای اتاق (درجه {0}} درجه) بازگردد و به طور مساوی متزلزل شود تا آن را یکنواخت کند. سپس 20 برابر محلول شستشوی غلیظ با آب خالص (به عنوان مثال ، محلول شستشوی غلیظ 5 میلی لیتر به آب خالص 95 میلی لیتر اضافه می شود) ، خوب مخلوط کنید ، و مایع شستشوی رقیق شده را می توان به مدت 7 روز در درجه {4}} ذخیره کرد.

1.2 آماده سازی نمونه

① خون کامل حیوانات گرفته شد ، به مدت 10 دقیقه در 4000 دور در دقیقه سانتریفیوژ شد و Supernatant جمع آوری شد. سرم همچنین می تواند به طور طبیعی بدون همولیز منعقد شود.

sample نمونه سرم 1: 1 را رقیق کنید (نمونه سرم 70UL را به رقیق نمونه 70UL اضافه کنید) و کاملاً مخلوط کنید.

توجه: کنترل های منفی و مثبت نیازی به رقیق شدن ندارند.

1.3 روش تست

میکروپلیت برچسب آنزیم (با توجه به تعداد نمونه ها ، می توانید چندین بار از هم جدا شده و استفاده کنید) ، 100UL از سرم رقیق شده را به میکروپلیت برچسب آنزیم اضافه کنید ، هر کدام دو چاه را برای نمونه های منفی و مثبت قرار دهید و هر کدام 100UL را برای منفی اضافه کنید و به ترتیب کنترل مثبت به واکنش. با استفاده از فیلم صفحه آب بندی برای پوشاندن صفحه ، نمونه را به آرامی در چاه تکان دهید و به مدت 60 دقیقه در 37 درجه انکوبه کنید.

the فیلم صفحه آب بندی را باز کنید ، محلول را در چاه در صفحه تکان دهید ، 300 میکرولیتر مایع شستشوی غلظت کار را به هر چاه اضافه کنید و سپس مایع را در چاه دور کنید. مراحل فوق را 5 بار تکرار کنید و در آخر روی یک کاغذ جاذب تمیز خشک کنید.

100 میکرولیتر از آنزیم به هر چاه کونژوگه شده ، صفحه را بپوشانید و به مدت 30 دقیقه در 37 درجه انکوبه کنید.

the فیلم صفحه آب بندی را باز کنید ، محلول را در چاه در صفحه خاموش کنید ، 300 میکرولیتر مایع شستشوی غلظت کار را به هر چاه اضافه کنید و سپس مایع را در چاه دور کنید. مراحل فوق را 5 بار تکرار کنید و در آخر روی یک کاغذ جاذب تمیز خشک کنید.

محلول بستر 100 میکرولیتر برای هر چاه ، صفحه را بپوشانید و به مدت 15 دقیقه با 37 درجه دور از نور انکوبه کنید.

محلول متوقف شده 50 میکرولیتر برای هر چاه ، و نتیجه را در مدت 5 دقیقه تعیین کنید.

مرحله 2 تفسیر نتیجه

مقدار OD450 از هر چاه در خواننده میکروپلیت {1}}} خوانده شد.

اعتبار سنجی 2.1

The average OD450nm value of negative control was ≥ 0.5 and the blocking rate of positive control was >50 ٪ ، نتایج تجربی معتبر بود. در غیر این صورت ، آزمایش باید تکرار شود.

2.2 روش محاسبه

برای هر نمونه ، PI (انسداد Ate) را به شرح زیر با استفاده از نمونه و مقادیر کنترل شده محاسبه کنید:

2.3 تفسیر نتیجه

وقتی PI <40 ٪ ، به عنوان منفی قضاوت می شود.

هنگامی که PI> 50 ٪ ، به عنوان مثبت قضاوت می شود.

هنگامی که 40 ٪ کمتر یا مساوی با PI کمتر از یا برابر با 50 ٪ ، به عنوان مشکوک قضاوت می شود و پیشنهاد می کنید یک هفته بعد نمونه برداری را تکرار کنید و آزمایش کنید.

تگ های محبوب: آنتی بادی ویروس Pseudorabies Anti-Ge آنتی بادی ELISA کیت ، چین ضد GE Pspercine Pseudorabies ویروس آنتی بادی ELISA کیت ، تولید کنندگان ، کارخانه