آنتی بادی ویروس تولید مثل و تولید مثل و تنفسی آنتی بادی ELISA

مشخصات

PRRSV AB ELISA

استفاده در نظر گرفته شده: تولید مثل و تنفسی گوشت خوک

کیت تشخیص آنتی بادی ویروس Syndrome ELISA برای تعیین آنتی بادی PRRSV خاص در سرم خوک در شرایط آزمایشگاهی است. این آزمایش برای ارزیابی واکسینه شده از

ایمن سازی با تولید مثل گوشت خوک و

واکسن ویروس ویروس سندرم تنفسی مزارع خوک.

نمونه: سرم

مواد ارائه شده:

روشهای آزمون و تفسیر

مرحله 1 روش آزمون

1.1 آماده سازی محلول شستشو

Wغلظت ارکینگ wمایع ashing:قبل از استفاده ، محلول شستشو باید به دمای اتاق (درجه {0}} درجه) بازگردد و به طور مساوی متزلزل شود تا آن را یکنواخت کند. سپس 20 برابر محلول شستشوی غلیظ با آب خالص (به عنوان مثال ، محلول شستشوی غلیظ 5 میلی لیتر به آب خالص 95 میلی لیتر اضافه می شود) ، خوب مخلوط کنید ، و مایع شستشوی رقیق شده را می توان به مدت 7 روز در درجه {4}} ذخیره کرد.

1.2 آماده سازی نمونه

① خون کامل حیوانات گرفته شد ، به مدت 10 دقیقه در 4000 دور در دقیقه سانتریفیوژ شد و Supernatant جمع آوری شد. سرم همچنین می تواند به طور طبیعی بدون همولیز منعقد شود.

sample نمونه سرم 1:50 (نمونه سرم 3UL را به رقیق نمونه 147UL اضافه کنید) و کاملاً مخلوط کنید.

توجه: کنترل های منفی و مثبت نیز به رقیق نیاز دارند.

1.3 روش تست

میکروپلیت برچسب آنزیم (با توجه به تعداد نمونه ها ، می توانید چندین بار از هم جدا شده و استفاده کنید) ، 100UL از سرم رقیق شده را به میکروپلیت برچسب آنزیم اضافه کنید ، هر کدام دو چاه را برای نمونه های منفی و مثبت قرار دهید و هر کدام 100UL را برای منفی اضافه کنید و به ترتیب کنترل مثبت به واکنش. با استفاده از فیلم صفحه آب بندی برای پوشاندن صفحه ، نمونه را به آرامی در چاه تکان دهید و به مدت 30 دقیقه در 37 درجه انکوبه کنید.

the فیلم صفحه آب بندی را باز کنید ، محلول را در چاه در صفحه تکان دهید ، 300 میکرولیتر مایع شستشوی غلظت کار را به هر چاه اضافه کنید و سپس مایع را در چاه دور کنید. مراحل فوق را 5 بار تکرار کنید و در آخر روی یک کاغذ جاذب تمیز خشک کنید.

③ 100 میکرولیتر آنزیم به هر چاه کونژوگه شده ، صفحه را بپوشانید و به مدت 45 دقیقه در 37 درجه انکوبه کنید.

the فیلم صفحه آب بندی را باز کنید ، محلول را در چاه در صفحه خاموش کنید ، 300 میکرولیتر مایع شستشوی غلظت کار را به هر چاه اضافه کنید و سپس مایع را در چاه دور کنید. مراحل فوق را 5 بار تکرار کنید و در آخر روی یک کاغذ جاذب تمیز خشک کنید.

محلول بستر 100 میکرولیتر برای هر چاه ، صفحه را بپوشانید و به مدت 10 دقیقه با 37 درجه دور از نور انکوبه کنید.

محلول متوقف شده 50 میکرولیتر برای هر چاه ، و نتیجه را در مدت 5 دقیقه تعیین کنید.

مرحله 2 تفسیر نتیجه

مقدار OD450 از هر چاه در خواننده میکروپلیت {1}}} خوانده شد.

اعتبار سنجی 2.1

میانگین مقدار OD450nm از کنترل منفی بود<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 روش محاسبه

برای هر نمونه ، S/P را به شرح زیر با استفاده از مقادیر تصحیح شده و مقادیر کنترل محاسبه کنید:

2.3 تفسیر نتیجه

وقتی S/P<0.46, it is judged as negative.

هنگامی که S/P بزرگتر از یا مساوی با 0 56 ، به عنوان مثبت قضاوت می شود.

هنگامی که 0. 46 کمتر از یا مساوی با S/P<0.56, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

تگ های محبوب: آنتی بادی ویروس تولید مثل و تولید مثل و تنفسی ویروس ELISA ، کیت ، تولید مثل و تولید مثل و توبانک چینی آنتی بادی آنتی بادی ELISA ، تولید کنندگان ، تولید کنندگان ، کارخانه