کیت آنتی بادی ویروس تب خوکی کلاسیک ELISA

مشخصات

 

 

روشهای آزمون و تفسیر

 

مرحله 1 روش آزمون

1.1 آماده سازی محلول شستشو

Wغلظت ارکینگ wمایع ashing:قبل از استفاده ، محلول شستشو باید به دمای اتاق (درجه {0}} درجه) بازگردد و به طور مساوی متزلزل شود تا آن را یکنواخت کند. سپس 20 برابر محلول شستشوی غلیظ با آب خالص (به عنوان مثال ، محلول شستشوی غلیظ 5 میلی لیتر به آب خالص 95 میلی لیتر اضافه می شود) ، خوب مخلوط کنید ، و مایع شستشوی رقیق شده را می توان به مدت 7 روز در درجه {4}} ذخیره کرد.

1.2 آماده سازی نمونه

① خون کامل حیوانات گرفته شد ، به مدت 10 دقیقه در 4000 دور در دقیقه سانتریفیوژ شد و Supernatant جمع آوری شد. سرم همچنین می تواند به طور طبیعی بدون همولیز منعقد شود.

② سرم را رقیق کنید تا 10 بار در صفحه رقیق کننده سرم آزمایش شود (به عنوان مثال: 15UL از سرم را اضافه کنید تا به رقیق نمونه 135UL آزمایش شود).

توجه: کنترل های منفی و مثبت نیازی به رقیق شدن ندارند.

1.3 روش تست

microplate برچسب آنزیم (با توجه به تعداد نمونه ها ، می توانید چندین بار از هم جدا شده و استفاده کنید) ، 100UL از سرم رقیق شده را به میکروپلیت برچسب آنزیم اضافه کنید ، هر کدام دو چاه را برای کنترل منفی و کنترل مثبت اضافه کنید و 100UL را به آن اضافه کنید. واکنش به ترتیب خوب. با استفاده از فیلم صفحه آب بندی برای پوشاندن صفحه ، نمونه را به آرامی در چاه تکان دهید و به مدت 30 دقیقه در 37 درجه انکوبه کنید.

the فیلم صفحه آب بندی را باز کنید ، محلول را در چاه در صفحه تکان دهید ، 300 میکرولیتر مایع شستشوی غلظت کار را به هر چاه اضافه کنید و سپس مایع را در چاه دور کنید. مراحل فوق را 5 بار تکرار کنید و در آخر روی یک کاغذ جاذب تمیز خشک کنید.

100 میکرولیتر از آنزیم به هر چاه کونژوگه شده ، صفحه را بپوشانید و به مدت 30 دقیقه در 37 درجه انکوبه کنید.

the فیلم صفحه آب بندی را باز کنید ، محلول را در چاه در صفحه خاموش کنید ، 300 میکرولیتر مایع شستشوی غلظت کار را به هر چاه اضافه کنید و سپس مایع را در چاه دور کنید. مراحل فوق را 5 بار تکرار کنید و در آخر روی یک کاغذ جاذب تمیز خشک کنید.

محلول بستر 100 میکرولیتر برای هر چاه ، صفحه را بپوشانید و به مدت 10 دقیقه با 37 درجه دور از نور انکوبه کنید.

محلول متوقف شده 50 میکرولیتر برای هر چاه ، و نتیجه را در مدت 5 دقیقه تعیین کنید.

 

مرحله 2 تفسیر نتیجه

مقدار OD450 از هر چاه در خواننده میکروپلیت {1}}} خوانده شد.

اعتبار سنجی 2.1

میانگین مقدار OD45 {1} nm nm کنترل منفی <{4}} 2 و میانگین مقدار OD450nm کنترل مثبت بیشتر از یا برابر با 0.7 بود ، نتایج تجربی معتبر بود. در غیر این صورت ، آزمایش باید تکرار شود.

2.2 روش محاسبه

برای هر نمونه ، S/ P را به شرح زیر با استفاده از مقادیر تصحیح شده و مقادیر کنترل محاسبه کنید:

2.3 تفسیر نتیجه

هنگامی که S/P <0. 2 ، به عنوان منفی قضاوت می شود.

هنگامی که s/p> 0. 3 ، به عنوان مثبت قضاوت می شود.

هنگامی که {{0}}. 2 کمتر از یا مساوی با S/P کمتر از یا مساوی 0.3 ، به عنوان مشکوک قضاوت می شود و پیشنهاد می کنید یک هفته بعد نمونه برداری را تکرار کنید و آزمایش کنید.

 

تگ های محبوب: آنتی بادی ویروس تب خوکی کلاس کلاسیک ELISA ، کیت کلاس کلاسیک تب خوکی چین آنتی بادی ELISA کیت ، تولید کنندگان ، کارخانه